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Illumina FC-131-2003 Nextera XT Index Kit v2 基因測序索引試劑盒

更新時間:2025-05-02      點擊次數(shù):669
Illumina FC-131-2003 Nextera XT Index Kit v2 基因測序索引試劑盒產(chǎn)品介紹
在基因測序技術(shù)飛速發(fā)展的當(dāng)下,高效且準(zhǔn)確的文庫構(gòu)建與樣本區(qū)分方法對于科研工作的推進至關(guān)重要。Illumina 公司推出的 FC-131-2003 Nextera XT Index Kit v2 基因測序索引試劑盒,憑借其的設(shè)計和的性能,成為眾多科研人員在新一代測序(NGS)實驗中的得力助手。
一、產(chǎn)品概述
Nextera XT Index Kit v2 是專為配合 Nextera XT DNA 文庫制備試劑盒而設(shè)計的索引試劑盒,旨在為測序文庫引入的索引序列,實現(xiàn)多個樣本在同一測序反應(yīng)中的高效區(qū)分與分析 。該試劑盒共有 A、B、C、D 四套,每套均包含 96 個索引,具備對 384 個樣本進行靈活多樣組合的能力,能夠滿足不同規(guī)模科研項目的需求。無論是小型實驗室針對少量樣本的精細研究,還是大型科研機構(gòu)開展的大規(guī)?;蚪M測序項目,都能借助該試劑盒實現(xiàn)高效的樣本管理和測序分析。
二、核心技術(shù)亮點
  1. 雙端索引策略:該試劑盒采用了雙端索引(Dual Indexing)技術(shù),通過為每個樣本添加一對的索引序列(Index 1 和 Index 2) 。這種雙索引系統(tǒng)極大地增加了樣本區(qū)分的準(zhǔn)確性和多樣性。在測序數(shù)據(jù)處理過程中,憑借這兩個索引信息,能夠精準(zhǔn)地將混合樣本中的測序數(shù)據(jù)對應(yīng)到各自的原始樣本,有效降低了樣本混淆的風(fēng)險,確保了數(shù)據(jù)的可靠性。例如,在對大量臨床樣本進行全基因組重測序時,雙端索引策略可準(zhǔn)確無誤地識別每個樣本的測序數(shù)據(jù),為后續(xù)的疾病關(guān)聯(lián)分析提供堅實基礎(chǔ)。

  1. 基于 PCR 的索引添加:試劑盒利用 PCR 技術(shù),將索引序列高效地添加到 DNA 文庫片段的兩端 。在 PCR 反應(yīng)過程中,引物攜帶的索引序列會與 DNA 片段特異性結(jié)合并擴增,使得每個文庫片段都帶上了特定的索引標(biāo)記。這種基于 PCR 的索引添加方式操作簡便、高效,能夠在較短時間內(nèi)完成大量樣本的索引添加工作。同時,通過優(yōu)化 PCR 反應(yīng)條件,可保證索引添加的均一性和準(zhǔn)確性,避免因 PCR 擴增偏好性導(dǎo)致的索引分布不均問題。

  1. 豐富的索引組合:每套 Nextera XT Index Kit v2 包含 12 個 Index 1(i7)和 8 個 Index 2(i5)適配器,通過不同的組合方式,可產(chǎn)生多達 96 種的雙索引組合 。這豐富的索引組合為大規(guī)模樣本的并行測序提供了有力支持。在宏基因組學(xué)研究中,需要對來自不同環(huán)境的大量微生物樣本進行測序分析,該試劑盒的豐富索引組合能夠滿足對眾多樣本的區(qū)分需求,助力科研人員全面了解微生物群落的多樣性和結(jié)構(gòu)組成。

三、產(chǎn)品性能優(yōu)勢
  1. 高樣本通量:憑借其豐富的索引數(shù)量和靈活的組合方式,Nextera XT Index Kit v2 能夠?qū)崿F(xiàn)高達 384 個樣本的同時測序 。這一高樣本通量特性大大提高了測序效率,減少了實驗成本和時間。在大規(guī)模的遺傳關(guān)聯(lián)研究中,需要對大量人群的基因組樣本進行分析,使用該試劑盒可一次性處理眾多樣本,快速獲得大量的測序數(shù)據(jù),加速研究進程,提高研究效率。

  1. 簡化實驗流程:試劑盒的設(shè)計旨在簡化整個實驗流程,科研人員只需按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程,將索引適配器與已制備好的 DNA 文庫進行 PCR 反應(yīng),即可完成索引添加 。無需復(fù)雜的操作步驟和額外的儀器設(shè)備,降低了實驗操作的難度和出錯概率。同時,試劑盒內(nèi)的試劑均經(jīng)過精心配置和優(yōu)化,確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。即使是實驗經(jīng)驗相對較少的科研人員,也能輕松上手,順利完成實驗操作。

  1. 廣泛的系統(tǒng)兼容性:該試劑盒與多種 Illumina 測序系統(tǒng)高度兼容,包括 MiniSeq、MiSeq、NextSeq 550 等 。無論科研人員使用的是桌面型的小型測序系統(tǒng),還是通量更高的中型測序平臺,都能無縫使用 Nextera XT Index Kit v2 進行樣本索引和測序分析。這種廣泛的系統(tǒng)兼容性為科研人員提供了更多的選擇空間,使其能夠根據(jù)自身實驗需求和實驗室現(xiàn)有設(shè)備,靈活選擇合適的測序系統(tǒng)開展研究工作。

四、應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 全基因組測序:在全基因組測序研究中,Nextera XT Index Kit v2 可用于對不同個體的基因組樣本進行標(biāo)記和混合測序 。通過準(zhǔn)確區(qū)分每個樣本的測序數(shù)據(jù),科研人員能夠全面檢測基因組中的各類遺傳變異,如單核苷酸多態(tài)性(SNP)、插入缺失(InDel)、拷貝數(shù)變異(CNV)等。這對于研究人類遺傳多樣性、尋找與復(fù)雜疾病相關(guān)的遺傳標(biāo)記以及開展群體遺傳學(xué)研究等具有重要意義。例如,在對大規(guī)模人群進行全基因組關(guān)聯(lián)分析時,利用該試劑盒對樣本進行索引,能夠高效地篩選出與疾病易感性相關(guān)的基因位點,為疾病的早期診斷和預(yù)防提供依據(jù)。

  1. 轉(zhuǎn)錄組分析:在轉(zhuǎn)錄組研究中,該試劑盒可用于對不同組織或細胞類型的 RNA 樣本進行文庫構(gòu)建和索引標(biāo)記 。通過對多個樣本的混合測序,科研人員能夠準(zhǔn)確比較不同樣本之間基因表達水平的差異,深入了解基因的表達調(diào)控機制。在研究腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的基因表達變化時,可同時對腫瘤組織和正常組織的 RNA 樣本進行索引和測序,分析差異表達基因,為腫瘤的診斷、治療和預(yù)后評估提供潛在的生物標(biāo)志物。

  1. 微生物組學(xué)研究:微生物組學(xué)研究通常需要處理大量來自不同環(huán)境的微生物樣本,Nextera XT Index Kit v2 的高樣本通量和準(zhǔn)確的樣本區(qū)分能力使其成為微生物組測序的理想選擇 ??蒲腥藛T可以利用該試劑盒對土壤、水體、腸道等環(huán)境中的微生物群落進行大規(guī)模測序,分析微生物的種類組成、豐度變化以及它們之間的相互關(guān)系。在研究腸道微生物與人體健康的關(guān)系時,可對大量個體的腸道微生物樣本進行索引和測序,探索腸道微生物群落結(jié)構(gòu)與疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián),為開發(fā)基于微生物的治療方法提供理論基礎(chǔ)。

  1. 靶向測序:在靶向測序?qū)嶒炛?,該試劑盒可用于對特定基因或基因組區(qū)域的文庫進行索引 。通過對多個靶向文庫的混合測序,能夠提高測序深度,更靈敏地檢測到低頻變異。在癌癥基因檢測中,針對與腫瘤相關(guān)的關(guān)鍵基因區(qū)域進行靶向測序,使用 Nextera XT Index Kit v2 對樣本進行索引,可在一次測序反應(yīng)中同時分析多個患者樣本,準(zhǔn)確檢測腫瘤驅(qū)動基因的突變,為癌癥的精準(zhǔn)治療提供重要的分子診斷依據(jù)。

五、產(chǎn)品使用說明
  1. 樣本要求:該試劑盒適用于多種類型的 DNA 樣本,如基因組 DNA、PCR 擴增產(chǎn)物等 。但需注意,樣本應(yīng)具備較高的質(zhì)量和完整性,建議使用高質(zhì)量的純化 DNA,起始量可根據(jù)實驗需求和樣本類型進行調(diào)整,一般在 ng 級別的低起始量即可滿足實驗要求。在樣本處理前,需對樣本進行嚴格的質(zhì)量檢測,確保其濃度、純度以及完整性符合實驗要求,以保證索引添加和后續(xù)測序的成功率。

  1. 實驗操作流程:使用 Nextera XT Index Kit v2 進行索引添加的操作流程相對簡便 。首先,根據(jù)實驗設(shè)計選擇合適的 Index 1 和 Index 2 適配器組合。然后,將適配器與已制備好的 DNA 文庫混合,加入 PCR 反應(yīng)體系中進行擴增。PCR 反應(yīng)條件需按照試劑盒說明書進行優(yōu)化設(shè)置,以確保索引序列的高效添加。反應(yīng)結(jié)束后,對 PCR 產(chǎn)物進行純化,去除未反應(yīng)的引物和其他雜質(zhì),得到帶有索引標(biāo)記的高質(zhì)量 DNA 文庫。最后,可根據(jù)需要對文庫進行定量和質(zhì)量檢測,確保文庫質(zhì)量符合測序要求。

  1. 存儲條件:為保證試劑盒的性能和穩(wěn)定性,Nextera XT Index Kit v2 應(yīng)存儲于 - 25°C 至 -15°C 的低溫環(huán)境中 。在使用過程中,應(yīng)盡量避免頻繁凍融,取用試劑后需及時放回低溫環(huán)境保存。同時,要注意試劑盒的有效期,在有效期內(nèi)使用以確保實驗結(jié)果的可靠性。



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